自从10月额济纳旗疫情爆发之后，中国北方的疫情此起彼伏，相关疫情多点暴发，且大多规模浩大，狡猾的疫情你方唱罢我登场，防不胜防。

突变数量是德尔塔病毒的两倍之多、具有更高的传播性和一定程度的免疫逃逸的“奥密克戎”更是来势汹汹，使得人心惶惶，天灾不可免，我们所能做的便是尽最大可能避免采样操作及核酸提取中的“人祸”，一款灭活性能足够可靠的灭活型病毒采样管成了很多工作人员“避免”人祸的最大寄托。

为此我们针对友康灭活型采样管的灭活性能做了以下实验验证——

一：实验依据

新冠病毒具有极强的传染性和致病性，进行检测时，医护人员面临着较大的感染风险。选用了灭活型病毒采样管产品的客户在操作过程中会一定程度的降低戒备心，一般会去除56℃灭活的处理过程，如果采样液本身不能对病毒进行及时的杀灭，其存在的安全风险会比非灭活型更高。

友康灭活型病毒采样管产品以多项灭活试剂联用的策略，采用胍盐为主，多组分配合的方案，不仅在5分钟内即可对病毒样本实现完全灭活，同时又不影响下游的核酸检测结果。

已有大量新冠病毒研究的数据表明在病毒浓度最高的阶段，新冠患者的口咽采样和鼻炎采样得到的病毒载量都低于10¹⁰ copies/mL的浓度范围内。所以我们采用灭活型的病毒采样管产品处理10¹⁰ copies的病毒，以评价灭活液的灭活效果。

参考文献：

Nature . 2020 May;581(7809):465-469. 

J Clin Microbiol . 2020 Jul 23;58(8):e01068-20.

https://doi.org/10.1101/2020.04.16.20067835

二：实验材料

1）实验用冠状病毒：采用猪传染性肠胃炎、猪流行性腹泻这两种冠状病毒二联活疫苗（HB08株+ZJ08株）经感染细胞后扩增得到的病毒液作为病毒原液。这两种冠状病毒与新型冠状病毒相似，且可以实现病毒在细胞中的扩增，适合用作实验的材料。

2）感染用细胞：VERO细胞。

3）灭活采样液：Ok138大阳城集团娱乐平台MT-0501产品灭活采样液。

4）主要试剂耗材：DMEM培养基，胎牛血清，病毒分离无血清培养基，PBS，TPCK-胰酶。

三：实验方案

模拟采样过程，将病毒液加入到灭活采样液中，进行充分混合，分别在不同的时间点终止灭活。并用终止灭活后的混合液去感染细胞，观察是否发生病变。

1）病毒液加入灭活采样液。室温下，将浓度为10¹⁰ copies/mL的冠状病毒以1：1体积比例加入至灭活采样液中，涡旋15s充分混合，相当于每毫升灭活液中加入10¹⁰ copies的病毒颗粒。

2）1min之后从混合液中取出100μL，采用友康病毒分离无血清培养基进行1000倍稀释以中和灭活液，终止灭活。

3）5min、10min和20min之后分别从混合液中取出100μL，与上步相同的方式，采用病毒分离无血清培养基进行1000倍稀释以中和灭活液，终止灭活。

4）阴性对照组为采用病毒分离无血清培养基对灭活采样液稀释2000倍的混合液。

5）阳性对照组为采用病毒分离无血清培养基对病毒液稀释2000倍的混合液。

6）采用各处理组感染细胞，连续观察并记录细胞病变情况。

4、实验结果

接毒后3天各组细胞的病变情况：

阴性对照组细胞生长正常：

病毒经灭活5分钟处理，细胞生长正常，无感染：

病毒经灭活10分钟处理，细胞生长正常，无感染：

病毒经灭活20分钟处理，细胞生长正常，无感染：

阳性对照组未经灭活液处理组，细胞发生显著病变：

5、实验结论

友康的灭活采样管产品对采集到的病毒样本在采样混合后5分钟即可实现灭活冠状病毒，使其失去感染能力。